KẾT QUẢ SO SÁNH QUẢ NA ĐÉT VÀ QUẢ NA NON BẰNG PHÂN TÍCH HPLC

BÁO CÁO

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU SO SÁNH QUẢ NA ĐÉT VÀ QUẢ NA NON

1. Mục tiêu, mục đích

• Xác định sử dụng quả Na đét hay quả Na non làm nguyên liệu sản xuất thuốc Y học cổ truyền.
• Xác định dung môi dùng để chiết xuất quả Na ứng dụng trong chiết xuất công nghiệp.

1. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu

2.1 Vật liệu nghiên cứu

• Quả Na đét (điếc), quả Na non của xã La Hiên, huyện Võ Nhai, Thái Nguyên.
• Người cung cấp: Dương Thị Dần; Số điện thoại: 097 195 3876.
  • Phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Phương pháp chiết xuất

– Cân 15 gram mỗi loại mẫu Na đét, Na non nghiền nhỏ cho vào bình thủy tinh tam giác 250ml, ghi tên mẫu.

– Chiết lần 1 và lần 2 bằng dung môi Ethanol 70% theo tỷ lệ 1:7; nhiệt độ 70^oC; thời gian 60 phút. Dịch chiết lần 1 và lần 2 trộn đều, lọc dịch qua màng giấy lọc Newstar, định lượng tổng thể tích dung dịch chiết Ethanol 70% thu được, ký hiệu Na đét  – E và Na non – E.

– Chiết lần 3 bằng dung môi nước theo tỷ lệ 1:7, nhiệt độ 85^oC, thời gian 60 phút. Dịch chiết nước được lọc qua màng giấy lọc Newstar, định lượng thể tích dung dịch thu được, ký hiệu Na đét – N và Na non – N.

2.2.2 Phương pháp xác định hàm lượng cao tổng số

– Dùng ống đong pipet hút 5ml riêng biệt từng dịch chiết Na đét  – E, Na non – E, Na đét – N và Na non – N cho vào cốc thủy tinh 100ml đã xác định khối lượng không đổi trước, cô nhẹ đến cạn, sau đó sấy 120^oC, thời gian 120 phút, cân xác định khối lượng cốc đến khi 2 lần liền kề không đổi. Mỗi mẫu dịch chiết thực hiện lặp lại 3 lần.

– Cách tính hàm lượng cao tổng số trong dược liệu theo dược điển Việt Nam.

– Hàm lượng cao tổng số Na đét (%) = Hàm lượng cao Na đét  – E (%) + Hàm lượng cao Na đét  – N (%).

– Hàm lượng cao tổng số Na non (%) = Hàm lượng cao Na non  – E (%) + Hàm lượng cao Na non  – N (%).

2.2.3 Phương pháp phân tích HPLC

– Chuẩn bị mẫu: Dùng ống đong pipet hút 5ml riêng biệt từng dịch chiết Na đét  – E, Na non – E, Na đét – N và Na non – N cho vào bình 250ml của máy cô quay chân không (DAIHAN Scientific WEV-003S), cô cạn ở nhiệt độ 50⁰C, sau đó hòa tan bằng Methanol HPLC, lọc qua màng 0,45µm lấy 1,5ml cho vào ống đựng mẫu HPLC, ghi nhãn.

– Phương pháp phân tích HPLC:

• Máy HPLC: Hitachi Chromater CM5000, cột Roc C18 Restek (250mm x 4,6mm, 5µm), đầu dò DAD.
• Phương pháp phân tích: Sử dụng phương pháp chạy Gradient với pha động là kênh B Acetonitrile, kênh C là H₂O chứa 0,1% acid Formic; Thể tích tiêm mẫu 10µl, tốc độ dòng 0,8ml/phút; nhiệt độ cột 30^o Đo dưới bước sóng 250nm.

• Kết quả nghiên nghiên cứu

3.1 Hàm lượng cao tổng số

Bảng 1: Kết quả hàm lượng cao tổng số

Nhận xét: Từ kết quả bảng 1 ta thấy hàm lượng cao tổng số Na đét là 4,8%, Na non là 11,95%. Như vậy, hàm lượng cao tổng số của Na non cao hơn Na đét gấp 2,5 lần.

• Kết quả phân tích HPLC

3.2.1 So sánh Na đét và Na non chiết Ethanol 70%

• Nhận xét: Từ kết quả sắc ký đồ ta thấy chiết Ethanol 70% của mẫu quả Na đét chứa số lượng và hàm lượng các hoạt chất sinh học cao hơn mẫu Na non.

• So sánh Na đét và Na non chiết nước

• Nhận xét: Từ kết quả sắc ký đồ ta thấy chiết nước của mẫu quả Na đét chứa số lượng và hàm lượng hoạt chất sinh học cao hơn mẫu Na non.
  • So sánh chiết Ethanol 70% và chiết nước của cùng mẫu quả Na Đét

• Nhận xét: Từ kết quả sắc ký đồ ta thấy chiết xuất bằng dung môi Ethanol 70% và dung môi nước với cùng mẫu Na đét thu được các hoạt chất sinh học tương đương nhau.

• So sánh chiết Ethanol 70% và chiết nước của mẫu quả Na non

• Nhận xét: Từ kết quả sắc ký đồ ta thấy chiết xuất bằng dung môi Ethanol 70% và dung môi nước với cùng mẫu Na non thu được các hoạt chất sinh học tương đương nhau.

1. Kết luận

• Hàm lượng cao tổng số trong quả Na non 11,95% cao hơn trong quả Na đét 4,8%.
• Hoạt chất sinh học và hàm lượng các chất trong quả Na đét cao hơn trong quả Na non.
• Chiết xuất bằng dung Ethanol 70% và dung môi nước thu được các chất sinh học tương đương nhau.

1. Khuyến nghị

• Sử dụng quả Na đét trong sản xuất thuốc y học cổ truyền.
• Chiết xuất quả Na đét bằng dung môi nước.